Analfistler er unormale og smertefulde passager, der dannes mellem endetarmen og huden omkring anus, men sygdomsudviklingen bag analfistler er stadig uklar. Patienter og kirurgiske faktorer kan kun delvist forklare sygdomsforløbet. Vi mener, at en forbedret forståelse af histologiske, mikrobiologiske og molekylære faktorer er afgørende for moderniseringen af behandlingen af analfistler for at sikre bedre resultater for patienten. Det overordnede formål med denne undersøgelse er at fastlægge den patologiske kaskade af begivenheder i udviklingen og den vedvarende tilstand af analfistler. Hypotesen er, at vævsmæssige faktorer, herunder de involverede immunceller og cytokiner, spiller en afgørende rolle, der skal adresseres i stedet for at udsætte patienterne for gentagne og ofte formålsløse operationer.
Sygdommen forringer i høj grad patienternes livskvalitet og kirurgerne mangler på nuværende tidspunkt en metode til at vurdere hvilke patienter, der vil have gavn af en given type operation og hos hvilke det er udsigtsløst.
Det er desuden velkendt, at immunomodulatorer og biologiske behandlinger er meget relevante som supplement til kirurgi ved behandling af anal fistler hos patienter med Crohns sygdom. Denne undersøgelse søger at bringe translationel forskning inden for fistelkirurgi for at afklare faktorer, der potentielt kunne revolutionere fremtidig fistelbehandling.
Målet med vores undersøgelse er at undersøge det immunologiske profil, herunder immuncellernes og biomarkørernes sammensætning i relation til de fire underarter af anal fistel: kryptoglandulære fistler, Crohn-lignende fistler og Crohns fistel +/- biologisk behandling.
Vores undersøgelse gennemføres i fire arbejdspakker:
- WP1 - Immunprofilering og status; at undersøge genekspression og ekstracellulær signalering af de fire fistelunderarter ved hjælp af qPCR og flowcytometri for at forbedre stratifikationen af fistelunderarter og forståelsen af fistel-patogenesen.
- WP2 - Celle signalering; at bestemme protein-niveauet og reguleringen på vævsniveau og i perifert blod ved hjælp af western blotting og biomarkør-tests.
- WP3 - Fibroblast; Primære fibroblaster isoleres og karakteriseres ved flowcytometri, og deres sårheling studeres in vitro.
- WP4 - Enkeltcelle RNA-sekventering (scRNAseq); scRNAseq er inkluderet for at give en udforskende evaluering af transcriptomet på enkeltcelle-niveau for at bidrage med detaljeret viden om molekylære forskelle mellem fistel-underarterne.
Patienter rekrutteres fra Mave-tarm Kirurgisk Afdeling. Alle patienter, der gennemgår fistelkirurgi som en del af standard klinisk behandling, inviteres til at deltage. Perifert blod og 'efterskabt' biologisk materiale fra anal fistler opnås og opbevares i projektbiobanken.
En dedikeret, godkendt forskningsbiobank er allerede etableret på Bispebjerg Hospital ("Fistelbiobank Bispebjerg") i et samarbejde mellem Københavns Center for Translationel Forskning og Mave-tarm Kirurgisk Afdeling, Bispebjerg Hospital. Der er en løbende rekruttering og vævsindsamling til biobanken, og blodprøver vil blive tilføjet efter godkendelse fra etikudvalget. I øjeblikket indeholder biobanken anal fistelvæv fra >100 patienter. Yderligere adskillelse af fistelvæv er blevet udført for at sikre højkvalitets levende enkeltceller.